Metodes vir die opstel van 'n neerslagreaksie

INHOUDSOPGAWE:

Metodes vir die opstel van 'n neerslagreaksie
Metodes vir die opstel van 'n neerslagreaksie
Anonim

Hierdie artikel sal aan die verskynsel van die neerslagreaksie gewy word. Hier sal ons die kenmerke van die formulering van hierdie verskynsel, die verskynsel van diffusie, algemene kenmerke, rol in die menslike lewe en nog baie meer oorweeg.

Inleiding tot die verskynsel

neerslagreaksie algemene kenmerk
neerslagreaksie algemene kenmerk

Presipitasie is 'n verskynsel van 'n serologiese tipe, waartydens oplosbare antigene met teenliggaampies in wisselwerking tree en as gevolg daarvan neerslag waargeneem word - 'n neerslag.

Die algemene kenmerk van die neerslagreaksie is 'n vorm van gekoördineerde invloed van antigeen en teenliggaampies. Hierdie tipe interaksies maak dit moontlik om die teenwoordigheid van onbekende antigene in die toetsstof te bepaal deur bekende teenliggaampies en antigene by te voeg. Die presipitasieproses sonder die teenwoordigheid van soute sal erger verloop, en die beste optimum lê binne die reeks van 7.0-7.4 pH.

Bestanddele van 'n reaksie

presipitasie reaksie komponente
presipitasie reaksie komponente

Daar is drie hoofelemente onder die komponente van die neerslagreaksie:

  1. 'n Antigeen met 'n molekulêre aard. Dit is in die fyn tipe toestand, met ander woorde, ditoplosbaar. So 'n antigeen word ook 'n presipitogeen genoem, wat 'n lysaat of weefselekstrak is, ens. 'n Presipitogeen het 'n kenmerkende verskil van 'n agglutinogeen, wat lê in die grootte van die deeltjies waaruit dit bestaan. Agglutinogeen het 'n inherente selgrootte, en presipitogene is in ooreenstemming met die grootte van die molekule. Die antigeenoplossing word gekenmerk deur deursigtigheid.
  2. 'n Teenliggaam gevind in menslike bloedserum, sowel as in immuun diagnostiese serum, wat die bestudeerde teenliggaampies bevat.
  3. Elektroliete is natriumchloriedoplossings wat isotonies is.

Presipitogenproduksie

Om 'n neerslagreaksie op te stel is onmoontlik sonder 'n presipitogeen, wat verkry word deur materiaal te maal en proteïenantigene daaruit te onttrek. Ekstraksie vind plaas deur kook of ander metodes.

Lysate, sowel as weefsel- en orgaanekstrakte, bloedserum, verskeie tipes filtrate gebaseer op mikrobiese souskulture, asook soutekstrak van mikroörganismes en outolisaatstowwe, is 'n treffende voorbeeld van presipitogene.

Opstel in neerslag

Kom ons kyk nou na die metode om die presipitasiereaksie op te stel.

'n Ring-neerslagreaksie word uitgevoer, wat in spesiaal voorbereide proefbuise plaasvind. Serum word in die holte van die skottelgoed ingebring, en gooi dit oor die muur met behulp van 'n pipet tuit. Vervolgens word die toepaslike hoeveelheid neerslag versigtig bo-op gelaag, en dan word die buis vanaf 'n horisontale een na 'n vertikale posisie gebring. Die opstel en inagneming van die neerslagreaksie is 'n baie noukeurige bewerking. Die resultaat word aangeteken na die verskyning van 'n wit ring op die grens tussen die antigeen en teenliggaam. As die reagerende elemente van die reaksie met mekaar ooreenstem, dan bind hulle, maar dit word merkbaar na 'n lang tydperk van hul interaksie

Die neerslagreaksie word ook in 'n Petri-bak of op 'n glas uitgevoer skyfie, waar agar gel oorgedra word, die toepassing van dit in 'n klein laag. Nadat dit in die jel hard geword het, word 'n klein aantal putte uitgesny waarin antigene en teenliggaampies geplaas sal word. Daar is twee maniere om hierdie aksie uit te voer: die metode van radiale immunodiffusie en dubbele immunodiffusie.

neerslagreaksie word nie gebruik nie
neerslagreaksie word nie gebruik nie

Algemene inligting

Die meganika van die werk van neerslag is soortgelyk aan die agglutinasie-toestel. Onder die invloed van immuuntipe serum verminder die antigeen, wat reeds in die reaksie aangegaan het, die mate van verspreiding daarvan. 'n Belangrike voorwaarde is die deursigtigheid van beide die serum en die antigeen.

Jy kan die registrasie van die reaksie verbeter as jy antigene op teenliggaampies plaas. As gevolg hiervan kan die voorkoms van neerslae in die vorm van 'n ring waargeneem word. Hierdie verskynsel word ringneerslag genoem en word uitgevoer in spesiale buise met 'n deursnee van 2,5 tot 3,5 mm. Een van die mees algemene voorbeelde van 'n neerslagreaksie is die diagnose van miltsiekte.

Presipitasie maak dit moontlik om die vlak van tokgenisiteit van 'n witseerkeelkultuur in agar te bepaal.

Tydens die reaksie wat oorweeg wordpresipitasie van antigeniese komplekse en teenliggaampies vind plaas. Neerslag is 'n immunologiese verskynsel wat jou toelaat om die hoeveelheid teenliggaampies in die bloedserum van 'n siek of ingeënte persoon en diere te bepaal.

Titrasiegevolg

metodes om 'n neerslagreaksie op te stel
metodes om 'n neerslagreaksie op te stel

Dit is belangrik om te weet dat die data verkry deur titrasie van die bogenoemde metode nie kwantifiseerbaar is nie. Om 'n kwantitatiewe assessering van die vervatte aantal teenliggaampies te skep en te ontleed, is 'n spesiale reaksietegniek ontwikkel deur M. Heidelberger en E. Kabat, wat gebaseer is op die soektog en identifikasie van die ekwivalensiesone. Die vermenging van die ouderdomsgetal antigene met 'n konstante volume antiserum lei tot 'n toename in die aanvanklik gevormde presipitaat, en dan neem dit weer af as gevolg van 'n toename in die vermoë om die antigeenkomplekse op te los. Deur die hoeveelheid teenliggaampies in die supernatante in elke buis te bepaal, kan jy vind dat 'n sekere aantal skottelgoed met teenliggaampies vloeistof sal ontbreek. Hier, in vergelyking met ander proefbuise, sal die grootste neerslag gevorm word. As gevolg hiervan en die aftrekking van die antigeniese proteïenpresipitaat van die totale waarde van proteïene, is dit moontlik om die presiese waarde van die teenliggaampies in die volume van die spesifieke serum wat bestudeer word, te verkry. Verder word die hoeveelheid proteïenmolekules van die neerslag bepaal deur die hoeveelheid stikstof of deur gebruik te maak van kolorimetriese metodes.

Evaluering van waardes

stel en verantwoording vir die neerslagreaksie
stel en verantwoording vir die neerslagreaksie

Skatting van neerslagwaardes in diagnostiese metodologie moet die moontlikheid van die teenwoordigheid in die immuunserum van 'n teenliggaam wat nie die eienskap van presipitien het nie, in ag neem, waaruit dit volg dat die neerslag self nie gevorm na reaksie met antigene. Die lys van sulke molekules sluit onvolledige teenliggaampies en sommige spesies uit die groep gamma-A-globuliene in.

Die neerslagreaksie in laboratoriumtoestande vind sy toepassing in verskeie tipes modifikasies. Die termopresipitasiereaksie word byvoorbeeld gebruik om bakteriële antigene van botulisme, miltsiekte, ens., wat nie termiese denaturasie ondergaan nie, op te spoor. Anders as ringpresipitasie, gebruik hierdie tipe reaksie filtrate van die betrokke materiaal in 'n gekookte toestand.

Analise van die presipitasiereaksie in 'n komplekse mengsel laat 'n mens nie toe om die eienskappe van individuele elemente van die mengsel te karakteriseer nie. In sulke gevalle gebruik 'n persoon die metode van neerslag in agar, en gebruik ook immunoelektroferese.

Diffuse neerslag

neerslagreaksies
neerslagreaksies

In hierdie gebied van navorsing is daar die konsep van 'n diffuse neerslagreaksie (RPD). Dit is gebaseer op die vermoë om teenliggaampies en oplosbare antigene in die jel te diffundeer. Diffusie is die vermoë van 'n molekule van 'n sekere stof om in die molekules van 'n ander binne te dring, wat deur termiese beweging veroorsaak word.

Jel is 'n gedispergeerde tipe sisteem waarin die vloeistoffase eweredig in die vaste fase versprei is. Meestal word agargel vir so 'n reaksie gebruik.

Nadat die parameters gegee is, intoestande waaronder die molekules met betrekking tot mekaar kan diffundeer, sal hul ontmoeting gepaard gaan met die vorming van 'n antigeen + teenliggaamkompleks. So 'n neoplasma kan diffundeer, in die gel self, en dit sal neerslaan in die vorm van 'n strook wat met die blote oog opgespoor kan word. As die antigeen en teenliggaam homoloog is, sal geen band vorm nie.

Die skep van die toestande waaronder diffusie sal plaasvind terwyl dit in die agarlaag is, behels die giet van die komponente, maar die totale aantal putte en hul relatiewe posisie word bepaal deur die tipe taak wat vereis word, besluit. RPD gee 'n persoon die vermoë om onbekende geïsoleerde virusse op te spoor en te identifiseer deur te toets met bekende teenliggaampiesera.

Aansoek

diffuse neerslagreaksie
diffuse neerslagreaksie

Presipitasie word wyd gebruik, nie net in die diagnose van siektes nie, maar vind ook die toepassing daarvan in forensiese mediese ondersoeke. Dit is moeilik om 'n ontleding voor te stel waarin dit moontlik is om die soort bloed, deel van 'n orgaan of weefsel wat op 'n misdaadwapen gevind word, te bepaal wat nie die neerslagreaksie gebruik nie. Tydens hierdie proses word presipiterende sera gebruik wat verkry word deur verskeie diere en voëls te immuniseer. Dit is belangrik dat die serumtitervlak nie minder as 1:10000 is nie, en dit moet ook voldoende spesifisiteit hê. Van die bespeurde kol bloed of sy kors word 'n uittreksel gemaak vir fisies. oplossing, waaraan verder blootgestel sal wordpresipiterende serum. Volgens hierdie reaksie is dit moontlik om die tipes weefsel- en orgaanproteïene van beide mense en diere vas te stel. Die verkryging van bewolkte ekstrakte dwing 'n mens om na neerslag op agar te wend.

Gevolgtrekkings

Deur die geleesde inligting te ontleed, kan ons tot die gevolgtrekking kom dat neerslagreaksies uiters belangrik is vir 'n persoon, aangesien dit die diagnose van verskeie antigene deur teenliggaampies moontlik maak, word hierdie verskynsel ook wyd gebruik in forensiese mediese ondersoeke en laat jou toe om die tipe bloed, weefsel of orgaan deur verband met 'n bepaalde onderwerp. Daar is verskeie tipes en metodes van neerslag, wat gebruik word in ooreenstemming met die opkomende behoeftes van die probleem wat opgelos word.

Aanbeveel: