Die verskeidenheid bakteriële infeksies vereis 'n duidelike identifikasie van die patogeen en die definisie van sy spesie. Om die tipe mikro-organisme te bepaal, word mikrobioloë gehelp deur sy tinktoriese eienskappe - die vatbaarheid van die mikrobe vir kleuring met verskillende kleurstowwe. Hierdie metode laat jou toe om die morfologie van die patogeen te verken. Die tinktoriese eienskappe van bakterieë is van groot belang vir praktiese en teoretiese navorsing op die gebied van mikrobiologie.
Mikrobiese navorsing
In bakteriologie is daar baie metodes om mikroörganismes te kleur. Almal van hulle is gebaseer op die tinktoriese eienskappe van bakterieë. Kleuring laat jou toe om hul vorm, struktuur, grootte, relatiewe posisie te bepaal. Dit maak dit moontlik om die probleme van die sistematisering van die tipes mikroörganismes van algemene biologie en vergelykende mikrobiologie op te los.
Waarom verf hulle
Bakterieë is feitlikdeursigtige organismes, en sonder die gebruik van kleuring, is hulle swak sigbaar vir konvensionele mikroskopie. Jy kan spesiale tipes mikroskopie (fasekontras, donker veld) gebruik om voorwerpe te bestudeer, maar die maklikste manier is om te vlek, waarna die bakterieë in 'n konvensionele ligmikroskoop sigbaar word.
Voorbereiding
Ongeag die kleurtegniek wat gebruik word, is daar eenvormige reëls vir die voorbereiding van die voorwerp wat bestudeer word. Die volgende fases is verpligtend:
- Steriele instrumente maak 'n smeer op 'n glasskyfie.
- Die monster word gedroog. Dit word gedoen by kamertemperatuur of deur gebruik te maak van droogkaste.
- Gevolg deur die fiksasiestadium - mikroörganismes word met spesiale verbindings aan die glas geheg.
- Behoorlike kleuring - die monster word vir 'n vasgestelde tydperk met kleurstof bedek, waarna dit afgewas word.
- Finale droging - die monster word weer gedroog.
Die mees algemene kleurstowwe
Die kleurstowwe wat die meeste gebruik word, is gebaseer op anilien met verskillende suurwaardes (pH). Die meeste kleurstowwe is poeiers wat in alkohol verdun word.
Kleurstowwe waarin katione die kleurmiddels is, word basies genoem (pH groter as 7). Hulle kan gebruik word om mikroörganismes in rooi (magenta, safranien), violet (metielviolet, tionien), blou (metileenblou), groen (malachietgroen), bruin (chrisoïden) en swart (indulien) kleure te vlek.
Kleurstowwe, waarin die kleurstowwe anione is, word suur genoem (pH minder as 7). Hulle sal die monster rooi (eosien), geel (picrin) of swart (nigrosin) kleur.
Daar is 'n groep neutrale kleurstowwe (byvoorbeeld, rhodamine B), waar beide katione en anione as kleurmiddels optree.
Kultuur dood of lewendig
Vlekmetodes word in twee groepe verdeel volgens die lewensvorm van die toetsmonster.
- Vitale (lewenslange) kleuring. Hierdie metode om die eienskappe van mikroörganismes te bestudeer, word gebruik in die studie van lewende weefsels, wat dit moontlik maak om die lewensbelangrike prosesse van mikrobes waar te neem. Vir hierdie kleuring word kleurstowwe met lae toksisiteit en hoë penetrasiekrag gebruik.
- Na-noodsaaklike kleuring. Dit is die kleuring van dooie of doodgemaakte mikroörganismes. Danksy die tinktoriese eienskappe van bakterieë bepaal mikrobioloë hul struktuur. Dit is hierdie kleuring wat die meeste gebruik word.
Gram-positief en Gram-negatief
Dit is hierdie eienskappe van bakterieë wat in die instruksies vir verskeie medisyne gevind kan word. Hierdie metode om die tinktoriese eienskappe van bakterieë te bestudeer, is gebaseer op die gebruik van gentiaan-violetkleurstof en jodiumbinding. Dit is die tegniek van Hans Christian Gram, 'n Deense geneesheer wat dit in 1884 voorgestel het. As gevolg van hierdie kleuring word bakterieë in twee groepe verdeel:
- Gram (+) - word blou(stafilokokke en streptokokke).
- Gram (-) - vlek pienk tot rooi (enterobakterieë, salmonella, E. coli).
Verskillende kleurresultate is te wyte aan verskillende kleureienskappe van bakteriese mure. Die Gram-kleurmetode is steeds die belangrikste een in die diagnose van sommige aansteeklike siektes.
Ander kleurtegnieke
Kom ons karakteriseer nog 'n paar metodes wat algemeen in bakteriologie gebruik word.
- Ziehl-Nelson-metode - bepaal die suurweerstand van bakterieë. Dit identifiseer die veroorsakende middels van tuberkulose en mikobakteriose.
- Romanovsky-Giemsa-tegniek - kleur asidofiele (asynsuur en melksuur) bakterieë rooi, en basofiele (spirochete en protosoë) blou.
- Morozov se tegniek - kleur bakterieë bruin en maak hul flagella sigbaar.
Spore kan gesien word
Tsiel se fuchcin-kleuring laat jou toe om bakteriese spore te sien. Met 'n pienk kleur na kleuring, is hulle duidelik sigbaar teen die agtergrond van blou bakterieë. Hierdie metode is ook 'n instrument van bakteriologie en is van groot praktiese belang.
