Navorsing oor bakterieë vereis noukeurige werk met talle toerusting en instrumente. Om mikroörganismes so vinnig as moontlik in laboratoriumtoestande te laat vermeerder en om normale lewensaktiwiteit te kan handhaaf, word spesiale voedingsmedia gebruik. Hul samestelling en biofisiese toestande is geskik vir die aktiewe groei van 'n bakteriese kultuur.
Voedingstofmedia. Mikrobiologie en ander toepassings
Bakteriese kolonies word in die laboratorium gekweek op Petri-skottels gevul met jellieagtige of semi-vloeibare inhoud. Dit is voedingstowwe, waarvan die samestelling en eienskappe so na as moontlik aan natuurlike media is vir hoëgeh alte gewasgroei.
Sulke omgewings word gebruik in mikrobiologiese navorsing en in mediese diagnostiese laboratoriums. Laasgenoemde werk meestal met smere van patogene of opportunistiese bakterieë, waarvan die sistematiese posisie direk in die inrigting bepaal word.
Natuurlik en sintetiesWoensdag
Die basiese reël van werk met bakterieë is die korrekte keuse van die voedingsmedium. Dit moet aan talle kriteria voldoen, insluitend die inhoud van mikro- en makro-elemente, ensieme, 'n konstante waarde van suurheid, osmotiese druk, en selfs die persentasie suurstof in die lug.
Voedsame media word in twee groot groepe geklassifiseer:
- Natuurlike omgewings. Sulke mengsels word van natuurlike bestanddele voorberei. Dit kan rivierwater, plantdele, mis, groente, plant- en dierweefsels, gis, ens wees. Sulke omgewings word gekenmerk deur 'n hoë inhoud van natuurlike chemikalieë, waarvan die verskeidenheid die groei van bakteriese kultuur bevorder. Ten spyte van hierdie ooglopende voordele, laat natuurlike omgewings nie gespesialiseerde navorsing met spesifieke bakteriese stamme toe nie.
- Sintetiese media. Hulle verskil deurdat hul chemiese samestelling bekend is in presiese verhoudings van alle bestanddele. Sulke media word voorberei vir 'n spesifieke kultuur van bakterieë, waarvan die metabolisme vooraf aan die navorser bekend is. Om hierdie rede is dit eintlik moontlik om so 'n sintetiese omgewing vir die ontwikkeling van mikroörganismes voor te berei. Hulle word gebruik om die lewensbelangrike aktiwiteit van bakterieë te ontleed. Jy kan byvoorbeeld uitvind watter stowwe hulle in die omgewing vrystel en hoeveel. Mikro-organismes sal ook in natuurlike media groei, maar dit is onmoontlik om enige kwantitatiewe veranderinge in die samestelling op te spoor weens onkunde oor die aanvanklike proporsies van stowwe.
Differensiaal-diagnostiese omgewings
In die werk met bakterieë kan nie net gewone voedingsmedia gebruik word nie. Mikrobiologie is 'n groot wetenskap, en daarom, wanneer 'n studie gedoen word, is dit soms nodig om om een of ander rede 'n keuse van mikro-organismes te maak. Die gebruik van differensiële diagnostiese media in die laboratorium maak dit moontlik om die gewenste bakteriese kolonies op 'n Petri-skottel te selekteer volgens die biochemiese teken van hul lewensbelangrike aktiwiteit.
Die samestelling van sulke omgewings sluit altyd die volgende komponente in:
1. Voedingstowwe vir selgroei.
2. Ontleed substraat (stof).
3. 'n Aanwyser wat 'n kenmerkende kleur sal gee wanneer 'n sekere reaksie plaasvind.
'n Voorbeeld is die differensiële diagnostiese voedingsmedium "Endo". Dit word gebruik om kolonies bakterieë te kies wat laktose kan afbreek. Aanvanklik het hierdie medium 'n pienkerige kleur. As 'n kolonie mikroörganismes nie laktose kan afbreek nie, neem dit die gewone wit kleur aan. As die bakterieë hierdie substraat kan afbreek, verander hulle in 'n kenmerkende helderrooi kleur.
Elektiewe Woensdae
Diagnostiese laboratoriums werk dikwels met deppers wat baie verskillende tipes bakterieë bevat. Natuurlik, vir kwaliteit werk, is dit nodig om op een of ander manier die kolonies wat ons benodig uit dosyne buitestaanders te kies. Dit is waar 'n bakteriese groeimedium kan help, wat ideaal geformuleer is om net een tipe mikro-organisme te ondersteun.
Byvoorbeeld,so 'n elektiewe omgewing is slegs geskik vir die voortplanting van Escherichia coli. Dan, vanaf die saai van baie bakterieë op 'n Petri-skottel, sal ons net kolonies van dieselfde Escherichia coli sien en nie meer nie. Voordat met werk begin word, is dit nodig om die metabolisme van die bestudeerde bakterie goed te ken om dit suksesvol uit 'n mengsel van ander spesies te selekteer.
Soliede, halfvaste en vloeibare kultuurmedia
Bakterieë kan nie net op soliede substrate gekweek word nie. Voedingmiddelmedia verskil van mekaar in hul toestand van aggregasie, wat afhang van die samestelling tydens vervaardiging. Aanvanklik het hulle almal 'n vloeibare konsekwentheid, en wanneer gelatien of agar in 'n sekere persentasie bygevoeg word, stol die mengsel.
Vloeibare kultuurmedia word gewoonlik in proefbuise gevind. As dit nodig word om bakterieë onder sulke toestande te kweek, voeg 'n oplossing met 'n kultuurmonster by en wag 2-3 dae. Die resultaat kan verskil: 'n neerslag vorm, 'n film verskyn, klein vlokkies dryf, of 'n troebel oplossing vorm.
Digte kultuurmedium word dikwels in mikrobiologiese navorsing gebruik om die eienskappe van bakteriese kolonies te bestudeer. Sulke media is altyd deursigtig of deurskynend sodat dit moontlik is om die kleur en vorm van die kultuur van mikroörganismes korrek te bepaal.
Mediavoorbereiding
Substrate soos vleis-peptoonmengsels gebaseer op sous, gelatien of agar is baie maklik om voor te berei. As jy 'n soliede of semi-vloeibare substraat moet maak, in 'n vloeistofvoeg onderskeidelik 2-3% of 0, 2-0, 3% gelatien of agar by. Hulle speel 'n groot rol in die verharding van die mengsel, maar hulle is nie 'n bron van voedingstowwe nie. So word voedingstowwe verkry wat geskik is vir die groei van 'n bakteriese kultuur.
